產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：松材線蟲PCR試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào)：50次
  • 產(chǎn)品廠商：通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格：2990
  • 產(chǎn)品庫存：100
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
松材線蟲PCR試劑盒引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增松材線蟲，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
詳情介紹：
松材線蟲PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)： 
松材線蟲（Bursaphelenchus xylophilus），常見的松樹寄生蟲。成蟲蟲體長約 1 毫米，雌蟲尾部近圓錐形，末端圓；雄蟲尾部似鳥爪，向腹面彎曲。它通過松墨天牛等媒介昆蟲傳播，從而引發(fā)松材線蟲病。被其感染的松樹，針葉呈黃褐色或紅褐色，整株干枯死亡，腐爛。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)檢測松材線蟲菌的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)： 
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增松材線蟲，與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分：

編號(hào)

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL（紅蓋）

試劑二

超純水

1 mL（亮黃色）

試劑三

松材線蟲 PCR 引物混合液

100 μL（白蓋）

試劑四

松材線蟲 PCR 陽性對(duì)照（1×10E8 /μL）

50 μL（黃蓋）

試劑五

使用手冊(cè)

1 份

運(yùn)輸及保存：
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。
松材線蟲PCR試劑盒
自備試劑：
樣品 DNA。
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容?？梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 松材線蟲 PCR 陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）： 
3. 對(duì)N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：

成份

N+2 個(gè)樣品管

PCR 陰性對(duì)照

PCR陽性對(duì)照

PCR Magic Mix 3.0

各 20μL

20μL

20μL

松材線蟲PCR 引物混合液

各2μL

2μL

2μL

N+2個(gè)樣品DNA模板

各18μL

--

--

PCR 陰性對(duì)照（水）

--

18μL

--

PCR 陽性對(duì)照（松材線蟲PCR陽性對(duì)照1000倍稀釋液）

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)（35 個(gè)循環(huán)）

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測：
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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